作者：邢兰瑛 蔡东阁 方晓荷 韩志红 刘敏
【摘要】 目的 检测组织蛋白酶B(cathepsin B, CB)与基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase9, MMP9)在人类上皮性卵巢肿瘤中的表达，探讨两者与卵巢癌细胞的分化增殖、侵袭转移的关系。方法 采用链霉素亲和生物素过氧化物酶法(SP)进行免疫组织化学染色，用CB抗体、MMP9抗体标记上皮性卵巢肿瘤组织标本，综合染色强度和阳性细胞占总体细胞数的百分比进行染色判定，结合有关病理特征进行分析。结果 经统计学分析，CB、MMP9在上皮性卵巢癌中的表达与年龄、病理类型无相关性(P>0.05)，而与卵巢癌的临床分期、有无转移及腹水呈正相关(P<0.05)；CB与卵巢癌的组织学分级呈正相关(P<0.05)；上皮性卵巢癌中CB和MMP9表达呈正相关(r＝0.652,P<0.05)。结论 CB、MMP9与卵巢癌的恶性生物学行为密切相关，两者在其侵袭转移过程中发挥了重要的协同作用。
【关键词】 上皮性卵巢肿瘤；组织蛋白酶B；基质金属蛋白酶9；侵袭转移
Study of expression and correlation of cathepsin B and matrix metallo proteinase 9 in epithelial ovarian tumor
ABSTRACT: Objective To study the expression of CB and MMP9 in ovarian tumor with the histodifferentiation and invasion and metastasis. Methods The expressions of CB and MMP9 were detected by SP immunohistochemistry method in histological section of ovarian tumor, and the relationships between the results and the clinical pathological parameters of the patients were assessed. Results The expression of CB and MMP9 had marked correlation (P<0.05) with clinical stage, metastasis and ascites of the ovarian cancer. Moreover, the expression of CB had marked correlation (P<0.05) with pathologic grade. The positive correlation was observed between the expression of CB and MMP9 (r＝0.652, P<0.05). Conclusion The expression of CB and MMP9 in ovarian cancer cells is closely related to the tumor malignancy biological behaviour of ovarian cancer. They play an important synergistic action in the invasion and metastasis of ovarian cancer.
KEY WORDS: epithelial ovarian tumor; cathepsin B; matrix metalloproteinase9; invasion; metastasis
侵袭和转移是卵巢癌重要的生物学特征，是引起患者死亡的主要原因。随着对肿瘤病理的深入研究，人们认识到组织蛋白酶与基质金属蛋白酶的过表达与细胞癌变及侵袭转移有关，两者与肿瘤的关系成为国内外研究的热点。本课题通过分析组织蛋白酶B(cathepsin B, CB)与基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase9, MMP9)在人类上皮性卵巢肿瘤中的表达情况，分析两者与卵巢癌组织侵袭转移、分化增殖的关系，探讨其在卵巢癌早期诊断中的作用，为抗癌药物的研究提供新的靶点，为卵巢癌患者预后及病情监测提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料 从2002年5月至2006年3月在西安交通大学医学院第二附属医院和陕西省妇幼保健院妇产科接受初次手术治疗的上皮性卵巢癌患者32例(浆液性囊腺癌20例，黏液性囊腺癌12例)、交界性卵巢上皮性肿瘤患者9例(卵巢交界性浆液性囊腺瘤5例，卵巢交界性黏液性囊腺瘤4例)作为研究对象，年龄21-72岁，所有病例术前均无化疗、放疗、免疫治疗史，无毒物、药物、放射线、烟酒等危险因素接触史，无传染性肝炎、自身免疫性疾病史等其他合并症。按国际妇产科联盟(FIGO)1988年标准，在32例上皮性卵巢癌中，Ⅰ期7 例，Ⅱ期8 例，Ⅲ期9 例，Ⅳ期8 例。组织学分级：按3级标准，Ⅰ级12 例，Ⅱ级9 例，Ⅲ级11 例；有腹水22例，无腹水10例。选择同期在上述医院妇产科接受手术治疗并经组织病理学确诊的9例良性卵巢上皮性肿瘤(浆液性囊腺瘤5例，黏液性囊腺瘤4例)及同期手术中因其他良性疾病而切除的正常卵巢组织6例作为对照组，年龄19-69岁。
1.2 免疫组化染色方法及结果判定 兔抗人组织蛋白酶B单克隆抗体浓缩液，工作浓度1∶200，兔抗人MMP9单克隆抗体浓缩液，工作浓度1∶25，均购自武汉博士德生物工程有限公司。
CB免疫着色评估：CB 阳性表达于卵巢上皮细胞，呈弥漫分布的棕黄色颗粒，定位于细胞质或位于核周。综合染色强度和阳性细胞占总体细胞数的百分比进行半定量分析[1]。基本不着色0 分，着色淡1 分，着色适中2分，着色深3分；着色细胞占计数细胞的百分率≤5%为0分，6%-25%为1分，26%-50%为2分， ≥51%为3分。将每张切
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